Na última década, os casos de sífilis têm aumentado significativamente. Segundo o Boletim Epidemiológico de Sífilis 2020, no Brasil, entre 2010 e 2019, a taxa de detecção de sífilis adquirida aumentou de 2,1 casos por 100 mil habitantes para 72,8 casos para 100 mil. A taxa de sífilis em gestantes cresceu de 3,5 para 20,8 casos por 1 mil nascidos vivos.
O que é a sífilis?
A sífilis é uma doença silenciosa e de caráter sistêmico. Ela é causada pela bactéria Treponema pallidum, transmitida por contato sexual ou vertical (na gestação ou parto).
A transmissão de mãe para filho pode ter como consequência aborto, parto prematuro, retardo do desenvolvimento neuropsicomotor, lesões de pele e malformações, com mortalidade em torno de 40% nas crianças com sífilis congênita.
Quem possui sífilis pode apresentar diversas manifestações clínicas e diferentes estágios: a sífilis primária, secundária, latente e terciária.
A manifestação inicial é uma úlcera no local de entrada da bactéria, geralmente na região genital, que desaparece mesmo sem tratamento. Ainda manifestações iniciais incluem erupções ou manchas no tronco, nas mãos e pés; placas e lesões em mucosas. Esta fase pode ser acompanhada de sintomas inespecíficos como febre baixa, mal-estar e cefaleia. Se a doença não for tratada, pode evoluir para estágios mais graves acometendo o sistema nervoso central e cardiovascular.
Diagnóstico da sífilis
O Protocolo Clínico e Diretrizes Terapêuticas para Atenção Integral às Pessoas com Infecções Sexualmente Transmissíveis (PCDT-IST) recomenda que todo paciente diagnosticado com sífilis seja acompanhado durante um ano, por meio da realização de testes não treponêmicos para verificar a queda da titulação do patógeno.
Estes são os testes sugeridos:
| Técnica | Testes não treponêmicos |
| Floculação | VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) RPR (Rapid Test Reagin) USR (Unheated Serum Reagin) TRUST (Toluidine Red Unheated Serum Test) |
| Imunoenzimáticos | ELISA (Enzyme – linked immunossorbent assay) |
| Imunocromatográficos | Testes Rápidos – TR |
Em caso de gestantes, esse seguimento deve ser feito mensalmente e, no restante da população a cada três meses durante um ano.
Sempre que houver suspeita de sífilis congênita, deve-se realizar o VDRL no líquor da criança.
Como funciona o teste de floculação?
Os testes de floculação baseiam-se em uma suspensão antigênica que contém cardiolipina, colesterol e lecitina. No preparo da suspensão antigênica, a ligação desses componentes ocorre ao acaso e resulta na formação de estruturas arredondadas denominadas micelas.
A ligação de anticorpos em várias micelas resulta na floculação, que pode ser observada ao microscópio.
Fonte imagem: Sífilis: estratégias para diagnóstico no Brasil, Ministério da Saúde.
Escolha do teste de floculação para diagnóstico da sífilis
A escolha do teste não treponêmico vai depender de características como:
– O tipo de amostra a ser testada (líquor, soro ou plasma);
– Equipamentos disponíveis (banho-maria, microscópio); e
– Tamanho da rotina.
Veja as características e exigências de cada teste:
Fonte: Sífilis: estratégias para diagnóstico no Brasil, Ministério da Saúde.
Teste de VDRL em líquor
O VDRL é o único teste de floculação que pode ser utilizado para a pesquisa de anticorpos não treponêmicos no líquor. A realização do teste em amostras de líquor é uma ferramenta fundamental para o diagnóstico da sífilis congênita ou da neurossífilis.
Para realizar o VDRL em líquor, são necessários os seguintes materiais:
– Suspensão antigênica de VDRL preparada anteriormente
– Solução salina (NaCl 0,9%).
– Micropipeta de 10 µL.
– Micropipeta de volume variável (ajustável) entre 50 e 200 µL.
– Ponteiras descartáveis para volumes entre 50 e 200 µL.
– Recipiente para descarte de ponteiras.
– Placa de Kline (lâmina escavada com círculos côncavos).
– Agitador tipo Kline, ajustado para 180 ±2 rpm.
– Microscópio óptico comum (objetiva 10X e ocular 10X).
– Recipiente de vidro para descontaminação de produtos biológicos, contendo solução aquosa de hipoclorito de sódio (uma parte de água sanitária comercial mais quatro partes de água) ou contendo álcool 70% (peso a peso – p/p).
– Cronômetro.
– Caneta para escrever em vidro.
– Protocolo de trabalho.
Os procedimentos do VDRL qualitativo em amostras de líquor são:
- Pipete 50 µL do líquor em uma demarcação da placa de Kline.
- Cuidadosamente, faça a homogeneização da suspensão antigênica modificada.
- Pipete 10 µL da suspensão antigênica modificada na demarcação da placa que contém o líquor.
- Coloque a placa no agitador tipo Kline durante 8 minutos, com agitação de 180 rpm.
- Faça a leitura da reação em microscópio óptico, com objetiva de 10X e ocular de 10X, imediatamente após o término da agitação.
- Se não for observada floculação na amostra, a reação é negativa e o laudo pode ser emitido. Caso haja floculação na amostra de líquor puro, a reação é positiva. Neste caso, para determinar o título é necessário fazer a reação quantitativa por meio da diluição seriada do líquor em solução salina.
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Fonte: site Firstlab
